免疫胶体金技术的基本原理是什么？免疫胶体金制备方法是什么？

胶体金法是由氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠（柠檬酸钠）、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金也是免疫电镜技术中较为理想的免疫标记物。

免疫胶体金技术的基本原理是什么？

胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。 胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。 胶体金标记，实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷，与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能，可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合，因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。 免疫金标记技术主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中，这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大，称之为免疫金银染色。

免疫胶体金制备方法是什么？

用容量瓶量取200ml超纯水加入到500ml锥形瓶中，将锥形瓶置于磁力加热搅拌器加热板上，放入磁力搅拌子，打开搅拌旋钮至适当速度。用移液器吸取2ml 1%氯金酸溶液于上述200ml超纯水中，搅拌1min，关闭搅拌旋钮，打开加热旋钮，加热至沸腾。打开搅拌旋钮至适当速度，快速加入经微孔滤膜过滤。1%柠檬酸三钠溶液0.8ml，溶液在2分钟内由灰色变黑色最后变为红色，再继续加热搅拌10分钟。关掉加热旋钮，适当速度搅拌至室温，定容至200ml，4℃保存。